Nach dem 2:0-Erfolg in der ersten Runde beim Regionalligisten 1. FC Magdeburg wartet auf die Rothosen das nächste Auswärtsspiel mit der Partie beim MSV Duisburg. Das Spiel wird zwischen dem 7. und 11. September ausgetragen, die zeitgenaue Terminierung erfolgt zu einem späteren Zeitpunkt. Dies ergab die Auslosung, die am heutigen Dienstagabend im Rahmen einer Übertragung des TV-Senders Sky erfolgte. Es wurde dabei in zwei regionalen Gruppen (Nord und Süd) gelost. Die Zuteilung der Mannschaften zu den Gruppen erfolgte durch die Fachgruppe Frauen & Mädchenfußball nach regionalen Gesichtspunkten.
In der zweiten Runde des DFB-Pokals steigen die zwölf Teams der Google Pixel Frauen-Bundesliga der Saison 2023/2024 sowie die beiden Aufsteiger aus der 2. Frauen-Bundesliga in den Wettbewerb ein, nachdem diese in der ersten Runde ein Freilos hatten.